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技術文章/ article
ELISA試劑盒實驗看似簡單,其實不然。記得以前一個同學*次做ELISA實驗,跟我說,ELISA實驗簡直太簡單了,到第2次在次做ELISA實驗的時候,他驚訝了,說結果差別怎么這么大(同一份標本),第三次的時候,他決定認真的做一次,爭取做到同一份標本,這次讓他感受到ELISA并不是那么簡單,發覺其實挺難的。今天的文章中為大家講述一些ELISA實驗中的小技巧,希望對大家有所幫助!1.操作前應對實驗的物理參數有充分的了解,如環境溫度(保持在18C~25℃)、反應孵育溫度和孵育時間、...
ELISA實驗是我們大家最常見的實驗,也是比較容易出問題的實驗,可能你一不小心,你的整個實驗便是無功能重來那!所以小編給您講解在使用ELISA試劑盒做實驗的時候,有些細節若是做不好會出現實驗異常,或者效果不佳,那么你有想過是什么原因嗎?一、白板異常:顯色步驟結束后,酶標板所有孔均無顏色。陽性對照不顯色。1.試劑已過效期,或不同試劑盒組分混用(解決方式:檢查試劑的組分及批號,確認未過期以及所有組分均屬對應的試劑盒。不同試劑盒或不同批號的試劑不能混用)。2.錯加、漏加試劑底物、顯...
POD測試盒是一款能夠對移動設備進行端對端測試的工具,它的出現引起了許多人的關注。那么,為什么POD測試盒成為了測試領域的新寵兒呢?一、口碑好在測試領域,此測試盒的口碑是相當不錯的。在網上的評論區里,可以看到很多用戶對POD測試盒的好評,他們認為POD測試盒不僅功能強大、易于使用,而且成本低廉。這些優點讓POD測試盒得到了越來越多人的青睞。二、功能全此測試盒是一款功能非常全面的測試工具,它能夠對移動端從前端到后端的各個環節進行測試,并且可以用于各種類型的測試,例如自動化測試、...
在ELISA實驗過程中時常會出現復測現象即我們時常說的"花板"現象,這種現象影響檢驗結果的正確判讀,對工作造成一定的不利影響,一旦出現“花板",實驗結果必須放棄,重新進行,不僅浪費物料和時間,而且還會出現樣本量缺少、交叉污染、報告延遲等一系列問題。影響因素分析如下:一、標本因素正確處理標本,防止大規模溶血、血漿層異物、使用一次性加樣槍頭,防止交叉污染。血清和血漿均可以用于檢測,但血清的分離應在抽血后等血液wan全凝固后再離心。二、試劑因素正確保存及使用有效試劑。使用過期試劑及...
在分子生物學和基因研究領域,質量和濃度是DNA和RNA樣本分析的重要參數。因此,為了確保實驗結果的準確性和重復性,并且避免一些不必要的錯誤或偏差,研究人員需要進行DNA和RNA樣本的準確測定和質量控制。其中,POD(Picodrop)測試盒是一種簡單易用、高靈敏度和高精度的測試工具。測試盒是一種基于端光學技術的微量樣品測試系統,可以快速、準確地測定DNA和RNA樣品的質量和濃度。其特色在于,它使用一種先進的平板式窄視角水滴成像技術,可以測定樣品體積范圍在0.5-2μL之間,濃...
大分子抗原因其具有兩個以上的抗原決定簇,而可用雙抗體夾心法測定,小分子半抗原如di高辛、茶堿等藥物以及T3,T4及睪酮等激素因其只有一個抗原決定簇,從而無法使用雙抗夾心方法測定,只能采用競爭抑制法測定。具體步驟如下:1.先用抗小分子的特異抗體如雙抗體夾心法一樣包被固相并封閉。2.同時加入待測樣本和酶標的小分子,溫育一定時間后洗板;此步中,待測樣本的小分子將與酶標小分子競爭與固相上特異抗體結合。3.加入酶底物,溫育顯色測定,顯色的強弱與待測樣本中的小分子含量成反比。這種測定模式...
ELISA測定的陽性判斷值,通常是將大量陰性和陽性人群的測定數據進行統計分析后確定的,其確定依據為判斷結果的假陽性和假陰性率低。在陽性判斷值周圍一定范圍內之外的測定結果可歸為可疑,亦即ELISA測定的“灰區"。“灰區"的大小可用統計學方法確定。測定結果處于“灰區"的樣本,可通過確認試驗或追蹤檢測來確定到底是陽性還是陰性ELISA“灰區"是把定量分析的正常值范圍引入定性分析而建立的概念。灰區的設置有二種:(1)CO×(1±C),C為該試劑的批內C(一般在15%~2...
每一盒ELISA試劑盒里面都有一份對應的說明書,而每一份說明書里都會有寫樣本和稀釋液的稀釋比例,為什么樣本都需要稀釋呢?今天的文章中,將為您分析:為何ELISA實驗血清樣本都需要稀釋?在ELISA試劑盒實驗血清為什么要稀釋?有兩個原因:1)競爭抑制比較明顯,應稀釋競爭物;2)以降低非特異性反應,使特異性的抗原抗體反應充分體現出來。血清稀釋用普通的PBS即可,可加1%的BSA,能有效降低ELISA本底,當然如果你嫌麻煩我覺得用生理鹽水替代PBS關系也不大。不管你是用直接競爭還是...
在ELISA試劑盒中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:(1)固相載體的選擇:許多物質可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據此判明其吸附性能是否良好。(2)包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。...
熒光定量PCR試劑盒的操作步驟:1、取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其溶解。2、兩相分離每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。3、RNA沉淀將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10...
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